激光共聚焦顯微鏡

內(nèi)容簡(jiǎn)介

Confocal 利用放置在光源后的照明針孔和放置在檢測(cè)器前的探測(cè)針孔實(shí)現(xiàn)點(diǎn)照明和點(diǎn)探測(cè)，來(lái)自光源的光通過照明針孔發(fā)射出的光聚焦在樣品焦平面的某個(gè)點(diǎn)上，該點(diǎn)所發(fā)射的熒光成像在探測(cè)針孔上，該點(diǎn)以外的任何發(fā)射光均被探測(cè)針孔阻擋。照明針孔與探測(cè)針孔對(duì)被照射點(diǎn)或被探測(cè)點(diǎn)來(lái)說(shuō)是共軛的，因此被探測(cè)點(diǎn)即共焦點(diǎn)，被探測(cè)點(diǎn)所在的平面即共焦平面。計(jì)算機(jī)以像點(diǎn)的方式將被探測(cè)點(diǎn)顯示在計(jì)算機(jī)屏幕上，為了產(chǎn)生一幅完整的圖像，由光路中的掃描系統(tǒng)在樣品焦平面上掃描，從而產(chǎn)生一幅完整的共焦圖像。只要載物臺(tái)沿著Z軸上下移動(dòng)，將樣品新的一個(gè)層面移動(dòng)到共焦平面上，樣品的新層面又成像在顯示器上，隨著Z軸的不斷移動(dòng)，就可得到樣品不同層面連續(xù)的光切圖像 。

 

結(jié)果展示

 

I:面筋提取物顆粒染色拍照；II：乳膠顆粒染色拍照；III：生物膜細(xì)菌的死活分布3D圖；IV:細(xì)胞死活染色拍照；V：細(xì)胞內(nèi)線粒體定位；VI: 鬼筆環(huán)肽細(xì)胞骨架染色；VII: 組織免疫熒光（組織內(nèi)蛋白定位）；VIII:細(xì)胞內(nèi)熒光探針成像；IX：細(xì)胞免疫熒光。

 

 

服務(wù)說(shuō)明

送樣方式：

可接收自行處理好后用于直接拍攝的樣品，由我們提供拍攝服務(wù)；也可以委托平臺(tái)做前處理，如需前處理請(qǐng)客戶務(wù)必于送樣單內(nèi)附上詳盡的實(shí)驗(yàn)方案和處理步驟；實(shí)驗(yàn)所需的細(xì)胞和試劑等可自行提供，也可以委托平臺(tái)代購(gòu)。

需要您提供

1.可直接用于拍攝的片子（直接上機(jī)拍攝）

或者2.實(shí)驗(yàn)所需的樣品（含前處理方案+制片方法）

 

服務(wù)周期：

一般為樣品接收后的2-3周，具體實(shí)驗(yàn)周期及送樣時(shí)間請(qǐng)與客服溝通確認(rèn)，謝謝！

 

收費(fèi)說(shuō)明：

項(xiàng)目	價(jià)格
前處理費(fèi)用	依據(jù)具體實(shí)施方案議價(jià)
2D模式拍攝	300元/樣起
3D模式拍攝	300元/樣起
試劑費(fèi)用	依據(jù)實(shí)際訂購(gòu)價(jià)格

最終收費(fèi)以與工作人員溝通確定的價(jià)格為準(zhǔn)。

 

交付內(nèi)容：

2D模式每樣拍攝5-6個(gè)視野，3D模式每樣拍攝2-3個(gè)視野，結(jié)果反饋請(qǐng)?jiān)跍y(cè)試完成一周內(nèi)，不建議回收樣品，如有需要請(qǐng)?zhí)崆胺答伣o工作人員。

 

服務(wù)簡(jiǎn)介

激光掃描共聚焦顯微鏡（Confocal laser scanning microscope，簡(jiǎn)稱CLSM）是近代生物醫(yī)學(xué)圖象儀器。它是在熒光顯微鏡成象的基礎(chǔ)上加裝激光掃描裝置，使用紫外光或可見光激發(fā)熒光探針。利用計(jì)算機(jī)進(jìn)行圖象處理，從而得到細(xì)胞或組織內(nèi)部微細(xì)結(jié)構(gòu)的熒光圖象，以及在亞細(xì)胞水平上觀察諸如Ca2+、pH值、膜電位等生理信號(hào)及細(xì)胞形態(tài)的變化。

利用放置在光源后的照明針孔和放置在檢測(cè)器前的探測(cè)針孔實(shí)現(xiàn)點(diǎn)照明和點(diǎn)探測(cè)，來(lái)自光源的光通過照明針孔發(fā)射出的光聚焦在樣品焦平面的某個(gè)點(diǎn)上，該點(diǎn)所發(fā)射的熒光成像在探測(cè)針孔上，該點(diǎn)以外的任何發(fā)射光均被探測(cè)針孔阻擋。照明針孔與探測(cè)針孔對(duì)被照射點(diǎn)或被探測(cè)點(diǎn)來(lái)說(shuō)是共軛的，因此被探測(cè)點(diǎn)即共焦點(diǎn)，被探測(cè)點(diǎn)所在的平面即共焦平面。計(jì)算機(jī)以像點(diǎn)的方式將被探測(cè)點(diǎn)顯示在計(jì)算機(jī)屏幕上，為了產(chǎn)生一幅完整的圖像，由光路中的掃描系統(tǒng)在樣品焦平面上掃描，從而產(chǎn)生一幅完整的共焦圖像。只要載物臺(tái)沿著Z軸上下移動(dòng)，將樣品新的一個(gè)層面移動(dòng)到共焦平面上，樣品的新層面又成像在顯示器上，隨著Z軸的不斷移動(dòng)，就可得到樣品不同層面連續(xù)的光切圖像。

 

樣品要求

1,細(xì)胞爬片、石蠟切片、冰凍切片等可用于激光共聚焦的樣本。

2,原樣可是固體原樣，也可以分散后的樣品，質(zhì)量10-50mg。
3,測(cè)試的具體要求信息。

 

檢測(cè)項(xiàng)目

可以直接現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行拍攝，也可以做委托測(cè)試

現(xiàn)場(chǎng)測(cè)試機(jī)時(shí)預(yù)約

平臺(tái)負(fù)責(zé)機(jī)時(shí)預(yù)約，客戶攜帶樣品前去實(shí)驗(yàn)室自主測(cè)試。

樣品委托測(cè)試

客戶提供樣品，平臺(tái)負(fù)責(zé)預(yù)約機(jī)時(shí)并安排技術(shù)老師去測(cè)試，之后發(fā)送結(jié)果給客戶。

樣品制樣

客戶不清楚如何制樣時(shí)，平臺(tái)可提供制樣服務(wù)，部分載樣工具需收取一定材料費(fèi)。

 

 

生物掃描電鏡（SEM）

內(nèi)容簡(jiǎn)介

生物SEM介紹

生物掃描電鏡主要利用二次電子成像拍攝材料的表面三維形貌情況，拍攝照片為黑白照片；一般用來(lái)觀察細(xì)胞外表面的變形以及受損情況等，也可以觀察材料在細(xì)胞表面的分布情況，廣泛應(yīng)用于檢測(cè)生物樣品、非均相有機(jī)材料、無(wú)機(jī)材料等微米、納米范圍內(nèi)的表面特征。

服務(wù)說(shuō)明

送樣方式：

可接收固定好的細(xì)胞/組織樣品并附有詳細(xì)送檢要求的送樣單

①需要您提供的樣品：收集細(xì)胞/組織取樣（新鮮迅速取材），置于1.5ml離心管內(nèi)，加入2.5%的戊二醛溶液（固定液加滿離心管，使樣品完全浸沒在固定液中），放置于4℃過夜，請(qǐng)不要倒棄固定液，一般固定12h后可寄送。

②打印填寫完整的送樣單和樣品一起寄送。

樣品取材及固定常用方法

細(xì)胞類	106以上的細(xì)胞，用細(xì)胞刮刀刮下來(lái)，1500-3000轉(zhuǎn)離心，5-10min，收集細(xì)胞于1.5ml或2ml離心管，管底肉眼可見2-3粒大米狀樣品，如果細(xì)胞量很多，把細(xì)胞團(tuán)塊用細(xì)針尖挑成幾個(gè)小團(tuán)塊，棄上清，沿管壁緩慢加入4℃預(yù)冷的固定液，固定液完全浸沒樣品，然后放入4°C冰箱過夜。
組織類	新鮮取材，取材位置準(zhǔn)確，組織大小盡量在1-2mm³，離體取材后請(qǐng)盡快投入4℃預(yù)冷的固定液中，固定液完全浸沒組織，然后放入4°C冰箱過夜。
細(xì)菌類	吸取OD0.5-0.8的培養(yǎng)物，離心后棄培養(yǎng)基，收集菌體沉淀于管底黃豆大小，可以用PBS洗1-2次，齊上清，沿管壁緩慢加入4℃預(yù)冷的固定液，固定液完全浸沒樣品，然后放入4°C冰箱過夜。
*固定液的量請(qǐng)參考上圖，加至箭頭所示位置
*如樣品取材及固定有疑問請(qǐng)及時(shí)與 工作人員溝通

 

服務(wù)周期：

一般為樣品接收后的2-3周，具體實(shí)驗(yàn)周期及送樣時(shí)間請(qǐng)與工作人員溝通確認(rèn)，謝謝！

 

收費(fèi)說(shuō)明：

掃描電鏡全套服務(wù)（制片+拍攝）  500元/樣起。

最終收費(fèi)以與 工作人員溝通確定的價(jià)格為準(zhǔn)。

 

交付內(nèi)容：

每樣提供8-10張拍攝圖片，結(jié)果反饋請(qǐng)?jiān)跍y(cè)試完成一周內(nèi)，不建議回收樣品，如有需要請(qǐng)?zhí)崆胺答伣o工作人員。

服務(wù)參數(shù)

1． 樣品預(yù)處理裝置

1.1組合式液氮泥預(yù)冷制備裝置，過冷液氮溫度為-210℃

1.2帶有樣品托裝載機(jī)構(gòu)，可方便對(duì)接經(jīng)高壓冷凍處理或野外預(yù)冷樣品的

2．冷凍制備系統(tǒng)冷源

冷凍制備腔室和掃描電鏡冷臺(tái)、冷阱均采用過冷氮?dú)鈿饫浞绞剑?制備腔室冷臺(tái)和電鏡冷臺(tái)在10分鐘內(nèi)可從室溫降至-140℃以下，控溫精確；配置分體式安裝的21升液氮杜瓦瓶組件，無(wú)需補(bǔ)充液氮持續(xù)續(xù)運(yùn)行時(shí)間長(zhǎng)達(dá)20小時(shí)

3．高真空冷凍制備裝置

3.1真空系統(tǒng)

渦輪分子泵抽氣系統(tǒng)，制備腔室真空度優(yōu)于10-6 mbar量級(jí)（液氮冷卻時(shí)）；分子泵配有阻尼隔振裝置，60%以上的系統(tǒng)運(yùn)行時(shí)間內(nèi)前級(jí)旋轉(zhuǎn)機(jī)械泵無(wú)需工作

3.2 制備腔室冷臺(tái)和冷阱

冷凍制備腔室通過接口與電鏡腔室直接相連，方便樣品在冷凍制備腔室與電鏡冷臺(tái)之間的來(lái)回傳輸，具有重做樣品的能力

冷臺(tái)：溫度范圍為-190℃ ～ +100℃；溫度穩(wěn)定度為1℃

冷阱：冷臺(tái)附近設(shè)有防污染冷阱，冷阱溫度可低至-190℃

3.3 樣品傳輸通道采用門閥密封，無(wú)需潤(rùn)滑脂

3.4標(biāo)配斷裂操縱器冷刀組件斷裂裝置，可選高度可調(diào)的冷刀組件；可設(shè)置及貯存時(shí)間-溫度的升華參數(shù)曲線，全自動(dòng)升華操作；濺射鍍膜頭為低電壓冷濺射工作方式，標(biāo)配Pt靶，可選其它靶材，全自動(dòng)濺射鍍膜操作

4．樣品傳輸裝置

4.1結(jié)構(gòu)小巧，易操作

4.2密封方式：采用真空（壓差）及機(jī)械擰緊機(jī)構(gòu)雙重密封

5．掃描電鏡冷臺(tái)及冷阱

5.1掃描電鏡冷臺(tái)和冷阱

冷臺(tái)：-190℃ ～ +100℃；溫度穩(wěn)定度為1℃

冷阱：-190℃或更低

冷臺(tái)和冷阱采用獨(dú)立的雙氣路冷卻

5.2電鏡腔室配有CCD相機(jī)及LED照明，可在觸摸屏上顯示電鏡腔室內(nèi)部樣品及樣品臺(tái)圖像

6．觸摸屏控制

允許用戶自定義方案，可快速輸入和儲(chǔ)存方案以便隨時(shí)訪問調(diào)用，可實(shí)現(xiàn)自動(dòng)濺射及自動(dòng)升華刻蝕的功能，并且具有屏幕幫助及操作提示功能。通過CCD相機(jī)，屏幕可顯示制備腔室和掃描電鏡腔室內(nèi)部的圖像

 

服務(wù)簡(jiǎn)介

功能：普通掃描電鏡服務(wù)及冷凍掃描電鏡服務(wù)。

掃描電鏡冷凍傳輸系統(tǒng)與場(chǎng)發(fā)射掃描電鏡相結(jié)合，通過升華、斷裂等方法可直接在含水狀態(tài)下觀察樣品形貌，且無(wú)皺縮變形、可溶成分也被保留，是不失真觀察生物樣品精細(xì)結(jié)構(gòu)的最有效方法。

特點(diǎn)：該系統(tǒng)可與當(dāng)今主流的場(chǎng)發(fā)射掃描電鏡相結(jié)合，具有操作簡(jiǎn)便、形貌保真的特點(diǎn)。

 

檢測(cè)項(xiàng)目

適用于液體、半液體、生命材料及其它對(duì)各種干燥敏感的樣品（如溶膠、高分子材料等）的制備。

 

 

生物透射電鏡（TEM）

內(nèi)容簡(jiǎn)介

生物TEM介紹

生物透射電鏡是觀察和研究超微結(jié)構(gòu)的重要工具，可用于觀察細(xì)胞整體結(jié)構(gòu)、亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)。生物細(xì)胞樣品內(nèi)部形態(tài)觀察建議用專門應(yīng)用于生物樣品觀察的透射電鏡，其電壓在80-120kv可以降低生物樣品因高能電子束輻射而損傷的影響，同時(shí)依賴于生物樣品制備技術(shù)的發(fā)展，如超薄切片技術(shù)、負(fù)染色技術(shù)、冷凍制樣技術(shù)、細(xì)胞化學(xué)技術(shù)等，廣泛應(yīng)用于組織學(xué)、細(xì)胞學(xué)、病毒學(xué)、病理學(xué)及材料學(xué)等多個(gè)學(xué)科的研究中，如常用來(lái)觀察細(xì)胞整體結(jié)構(gòu)、細(xì)胞膜細(xì)胞壁細(xì)胞器的變化、材料進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部的分布情況、細(xì)胞應(yīng)付外界刺激產(chǎn)生的自噬小體，以及外界生物入侵的侵染結(jié)構(gòu)等等。

 

服務(wù)說(shuō)明

送樣方式：

可接收固定好的細(xì)胞/組織樣品并附有詳細(xì)送檢要求的送樣單

①需要您提供的樣品：收集細(xì)胞/組織取樣（新鮮迅速取材），置于1.5ml離心管內(nèi)，加入2.5%的戊二醛溶液（固定液加滿離心管，使樣品完全浸沒在固定液中），放置于4℃過夜，請(qǐng)不要倒棄固定液，一般固定12h后可寄送。

②打印填寫完整的送樣單和樣品一起寄送。

樣品取材及固定常用方法

細(xì)胞類	106以上的細(xì)胞，用細(xì)胞刮刀刮下來(lái)，1500-3000轉(zhuǎn)離心，5-10min，收集細(xì)胞于1.5ml或2ml離心管，管底肉眼可見2-3粒大米狀樣品，如果細(xì)胞量很多，把細(xì)胞團(tuán)塊用細(xì)針尖挑成幾個(gè)小團(tuán)塊，棄上清，沿管壁緩慢加入4℃預(yù)冷的固定液，固定液完全浸沒樣品，然后放入4°C冰箱過夜。
組織類	新鮮取材，取材位置準(zhǔn)確，組織大小盡量在1-2mm³，離體取材后請(qǐng)盡快投入4℃預(yù)冷的固定液中，固定液完全浸沒組織，然后放入4°C冰箱過夜。
細(xì)菌類	吸取OD0.5-0.8的培養(yǎng)物，離心后棄培養(yǎng)基，收集菌體沉淀于管底黃豆大小，可以用PBS洗1-2次，齊上清，沿管壁緩慢加入4℃預(yù)冷的固定液，固定液完全浸沒樣品，然后放入4°C冰箱過夜。
*固定液的量請(qǐng)參考上圖，加至箭頭所示位置
*如樣品取材及固定有疑問請(qǐng)及時(shí)與工作人員溝通

 

服務(wù)周期：

一般為樣品接收后的3-4周，具體實(shí)驗(yàn)周期及送樣時(shí)間請(qǐng)與工作人員溝通確認(rèn)，謝謝！

 

交付內(nèi)容：

每樣提供8-10張拍攝圖片，結(jié)果反饋請(qǐng)?jiān)跍y(cè)試完成一周內(nèi)，如需回收剩余物料及切片，請(qǐng)?zhí)崆皞渥⑶宄?，樣本回收默認(rèn)測(cè)試完成一周后寄出，如需盡早回收樣本，請(qǐng)及時(shí)反饋給工作人員。

服務(wù)簡(jiǎn)介

       以動(dòng)物模型及體外培養(yǎng)細(xì)胞模型為研究對(duì)象，研究疾病的發(fā)生發(fā)展規(guī)律，從而闡明疾病本質(zhì)的生物醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)學(xué)科。超微病理學(xué)技術(shù)是研究疾病的病因、發(fā)生發(fā)展機(jī)制，以及其形態(tài)和功能變化等的重要手段之一。超微病理學(xué)技術(shù)主要分為標(biāo)本制作和電鏡分析。

 

樣品要求

     標(biāo)本類型主要有動(dòng)植物組織器官、培養(yǎng)及脫落細(xì)胞、細(xì)菌、真菌、藍(lán)藻等，均需進(jìn)行以下制樣過程。

1．固定 標(biāo)本離體或離開原生活狀態(tài)1分鐘后立即投入4℃預(yù)冷的2.5％戊二醛緩沖電鏡固定液中，取材時(shí)應(yīng)絕對(duì)避免擠壓、損傷，推薦大小為1mm3 或者截面積為1mm2的5mm長(zhǎng)條隨后送檢。

2．標(biāo)本制作  送檢后標(biāo)本需經(jīng)過四氧化鋨后固定、脫水、樹脂半浸透、樹脂全浸透、樹脂包埋、高溫聚合、超薄切片及染色。

 

透射電鏡生物樣品取材基本要求 

第一 取材準(zhǔn)備   

1） 試劑   所需 2.5%戊二醛、0.1M PH7.35 的磷酸鹽緩沖液，注明配制日期及啟用日期，置于 4 攝氏度冰箱預(yù)冷（2.5%戊二醛預(yù)冷至少 1 小時(shí)以上；磷酸鹽緩沖液不宜長(zhǎng)時(shí)間預(yù)冷，容易結(jié)晶）。 

2） 儀器與器材   鋒利刀片（手術(shù)刀片或飛鷹雙面刀片）、鑷子、低溫操作臺(tái)、1.5mlEP管、培養(yǎng)皿（或者硬紙卡，盛戊二醛用）、注射器（植物組織用）、冷凍離心機(jī)（細(xì)菌、細(xì)胞、藻類等需要離心的樣品使用） 

2. 取材要求 

1） 快 

取材動(dòng)作要迅速，材料離體后 1min 鐘內(nèi)必須進(jìn)入戊二醛固定液，使組織、細(xì)胞盡可能保持原來(lái)生活狀態(tài)，解剖器械要用鋒利的刀片（新的手術(shù)刀片或飛鷹雙面刀片）劃切，避免牽拉或擠壓，盡量減少取材中的機(jī)械損傷。（動(dòng)物處死后 5min 內(nèi)完成此步驟，時(shí)間越短越好?。?nbsp;

2） 準(zhǔn)

取材要準(zhǔn)確 

①器官要準(zhǔn)確； 

②部位要準(zhǔn)確：如觀察腎臟腎小球或腦神經(jīng)元需取皮質(zhì)而不要取髓質(zhì)，觀察胰島盡量取胰尾。 

③胃腸道、皮膚、角膜、視網(wǎng)膜、耳蝸、骨骼肌等要注意方向性（橫切或縱切），取材成條狀（0.5mm×1mm×3mm），確保要觀察的部位在較長(zhǎng)的切面上。 

3） 冷 

取材過程應(yīng)在 0~4 攝氏度的操作臺(tái)上操作（或者是冰上操作，但要注意切勿使組織直接接觸或貼近冰面，需要以操作面板隔離，以免操作時(shí)間過長(zhǎng)而造成組織結(jié)冰出現(xiàn)冰晶損傷），所有器械、容器、2.5%戊二醛、PBS 需 4℃預(yù)冷足夠長(zhǎng)的時(shí)間。 

4） 小 

不定位組織大小為 1mm×1mm×1mm（盡可能小，可以更小為 0.5mm×0.5mm×1mm，越薄越好），如肝、肺、脾等不需要看特定結(jié)構(gòu)的非定位器官組織；定位組織如神經(jīng)、骨骼肌、腎、腦、腸、血管、胰島等組織取材大小為 0.5mm×1mm×3mm的長(zhǎng)條狀（越薄越好）。 

 

第二  不同樣本的取材方法

生物器官組織取材 

1. 浸入固定   麻醉（1%戊巴比妥鈉銨 5ml/kg 體重腹腔注射）或斷頭急性處死，解剖出所需器官，用解剖刀（鋒利刀片）取一小塊組織，立即（越快越好，1~3min 完成此操作）放入盛有預(yù)冷 2.5%戊二醛的培養(yǎng)皿（或硬紙片上）中，隨后立即沿小塊組織邊緣（已經(jīng)被固定）用鋒利刀片取 1mm×1mm×1mm 或 0.5mm×1mm×3mm 大小組織置于盛有預(yù)冷 2.5%戊二醛 1.5mlEP 管中繼續(xù)固定，4℃保存（請(qǐng)勿靠近冰箱邊上造成標(biāo)本冷凍結(jié)冰?。。。?。 

2. 灌注固定   腦組織等（初次取材者或未常規(guī)做灌注固定者此方法慎用，因在 TEM 結(jié)果出來(lái)前無(wú)法評(píng)價(jià)其固定是否成功）。 

 

培養(yǎng)細(xì)胞取材 

1. 貼壁細(xì)胞   培養(yǎng)好的細(xì)胞不經(jīng)漂洗直接倒出培養(yǎng)液后迅速加足量預(yù)冷 2.5%戊二醛固定10min，隨后用細(xì)胞鏟或細(xì)胞刷成 45°鈍角鏟下細(xì)胞（勿用胰蛋白酶消化）后全部轉(zhuǎn)移到15~50ml 離心管內(nèi)，轉(zhuǎn)速 800rpm 離心 5min，隨后去除大部分上清液（留 1ml 左右），將離心管里的細(xì)胞輕輕吹散后轉(zhuǎn)移到 1.5ml 的 EP 管內(nèi)1000~1500rpm（盡量低轉(zhuǎn)速，視不同細(xì)胞而言，建議先做一個(gè)轉(zhuǎn)速梯 800、1000、1500rpm 度試驗(yàn)，找到最低可以離心成團(tuán)的轉(zhuǎn)速）離心 5~10min 成團(tuán)（細(xì)胞團(tuán)大小約半個(gè)至一個(gè)綠豆大小為宜）。離心完成后輕輕吸去上清液，管底的細(xì)胞團(tuán)不要打散，沿管壁緩緩倒入適量的預(yù)冷 2.5%戊二醛，隨后置于4℃冰箱固定。（此過程操作輕柔，切勿損傷細(xì)胞?。?nbsp;

2. 懸浮細(xì)胞   直接將細(xì)胞培養(yǎng)液全部轉(zhuǎn)移到 15~50ml 離心管內(nèi)，轉(zhuǎn)速 800rpm 離心 5min，隨后去除大部分上清液（留 1ml 左右），將培養(yǎng)管里的細(xì)胞輕輕吹散后轉(zhuǎn)移到 1.5ml 的 EP管內(nèi)，1000~1500rpm（盡量低轉(zhuǎn)速，視不同細(xì)胞而言，建議先做一個(gè)轉(zhuǎn)速 800、1000、1500rpm 梯度試驗(yàn)，找到最低可以離心成團(tuán)的轉(zhuǎn)速）離心 5~10min 成團(tuán)（細(xì)胞團(tuán)大小約半個(gè)至一個(gè)綠豆大小為宜）。離心完成后輕輕吸去上清液，管底的細(xì)胞團(tuán)不要打散，沿管壁緩緩倒入適量預(yù)冷 2.5%戊二醛，隨后置于 4℃冰箱固定。（此過程操作輕柔，切勿損傷細(xì)胞?。?nbsp;

3. 細(xì)菌懸液（固體培養(yǎng)基自行轉(zhuǎn)移成懸浮液）   直接將細(xì)菌懸液全部轉(zhuǎn)移到 15~50ml 離心管內(nèi)，轉(zhuǎn)速 800~1500rpm 離心 5min，隨后去除大部分上清液（留 1ml 左右），將培養(yǎng)管里的細(xì)胞輕輕吹散后轉(zhuǎn)移到 1.5ml 的 EP 管內(nèi)，1500~3000rpm（視不同細(xì)菌而言，自行加大轉(zhuǎn)速，建議不超過 5000rpm）離心 5~10min 成團(tuán)（細(xì)胞團(tuán)大小約半個(gè)至一個(gè)綠豆大小為宜）。離心完成后輕輕吸去出上清液，管底的細(xì)胞團(tuán)不要打散，沿管壁緩緩倒入適量預(yù)冷 2.5%戊二醛，隨后置于 4℃冰箱固定。（此過程操作輕柔，切勿損傷細(xì)菌！） 

 

植物組織取材 

    植物取材較容易，取一小塊植物組織浸入盛有預(yù)冷 2.5%戊二醛培養(yǎng)皿（或硬紙卡）上，隨后用鋒利刀片切成 0.5mm×0.5mm×3mm 小長(zhǎng)條薄片，隨后抽取氣體。  抽取氣體   將植物組織同固定液一起倒入注射器，用乳膠手套食指堵住注射器出口，右手拉動(dòng)針?biāo)?，將注射器口垂直向上，松開食指，右手輕推針?biāo)ㄊ挂好嫔系臍馀輳淖⑸淦骺谂懦?，反?fù)多次，直至組織沉入固定液。 

 

 透射電鏡生物樣品運(yùn)輸基本要求 

用封口膜將 1.5mlEP 管管蓋再次封好，做好標(biāo)記，填好送樣申請(qǐng)單（必須填，隨樣品寄出紙質(zhì)版申請(qǐng)單）。隨后插在海綿板或可以減震的塑料上，用廢舊報(bào)紙包裹，放入 1~2 個(gè)冰袋，樣品盡可能遠(yuǎn)離冰袋固定放置，以防樣品出現(xiàn)冰晶損傷，寄出。 

 

檢測(cè)項(xiàng)目

一．     樣品包埋 送檢后標(biāo)本需經(jīng)過四氧化鋨后固定、脫水、樹脂半浸透、樹脂全浸透及樹脂包埋后高溫聚合。

二．     超薄切片 聚合后的組織樹脂包埋塊須在萊卡EM UC7超薄切片機(jī)下定位后，切下50-70nm薄片，隨后用銅網(wǎng)撈片。

三．     鉛鈾染色 制作好的樣品銅片經(jīng)醋酸鈾染色10min，后硝酸鉛再染色10min，即可閱片

四．     拍照分析 按照客戶拍照目的及拍照要求進(jìn)行分析。