檢測認證人脈交流通訊錄
食品肉毒桿菌檢測 奶粉肉毒桿菌檢測 肉毒桿菌檢測機構
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對應法規:國內外相關標準
CNAS認可項目:是
- 肉毒桿菌是一種生長在缺氧環境下的致病菌,在罐頭食品及密封腌漬食物中具有極強的生存能力,它在繁殖過程中所分泌的肉毒毒素具有極強的毒性,是KCN毒性的一萬倍。純化結晶的肉毒毒素1mg能殺死2億只小鼠,對人的致死劑量約0.1μg。它通過阻斷人體神經接頭,導致全身麻痹、癱瘓,嚴重時能引起人呼吸肌麻痹,導致無法呼吸,最終死亡。
目前報道新西蘭恒天然奶粉大批量被肉毒梭菌污染,給人們身心健康造成了極大的危害,國家加大了對食品質量安全的排查力度,為此,科標生物檢測中心現全面開展食品中肉毒梭菌檢測服務,為食品安全檢測貢獻一份力量。
科標生物檢測中心主要結合GB/T4789.12-2003食品中衛生微生物學檢驗 肉毒梭菌及內毒素檢驗和SN/T 2525-2010食品中肉毒梭菌的PCR檢測方法對食品中肉毒桿菌進行檢驗。
將樣品經增菌后劃平板分離單菌落,挑取可疑菌落到胰蛋白胨葡萄糖酵母浸膏肉湯(TPGY)培養基培養,對培養物用DNA提取試劑盒抽提DNA,進行PCR擴增,用瓊脂糖凝膠電泳檢驗PCR產物中是否含有肉毒梭菌的的特征條帶,從而對食品中是否污染肉毒梭菌進行快速檢測。
試驗方法
1、樣品的增菌培養
取庖肉培養基2管和TPGY培養基2管,煮沸10min~15min(為了排除溶解于培養基中的氧,切勿搖動),迅速冷卻。每15ml培養基中接種1g~2g固體食品或1ml~2ml液體食品(緩慢地將接種物接入肉湯液面下)。將樣品接種2管庖肉培養基(35±1℃下培養)和2管TPGY培養基(28±1℃下培養),均厭氧培養5天。觀察培養物的濁度、產氣、肉粒的消化和產生的氣味。若有生長繼續以下操作,若無生長,則繼續培養10天。
2、培養物分離
取2ml培養液置于無菌試管中,加入等量無菌無水乙醇,混勻,放置1h。用接種環取2環經處理過的培養物接種到厭氧卵黃瓊脂上,35±1℃下厭氧培養48h。挑取可疑菌落接種到TPGY培養基,35±1℃下厭氧培養24h。
3、DNA提取、擴增
取1.4mlTPGY培養物轉移到離心管中,13000r/min離心2min,棄去上清液。沉淀加入500μl生理鹽水,震蕩重懸30s,13000r/min離心2min,棄去上清液。沉淀中直接加入50μlDNA提取液充分混勻,沸水浴10min,13000r/min離心3min,取上清液4μl進行PCR擴增。擴增的DNA跑瓊脂糖凝膠電泳,電泳結果用凝膠成像系統記錄。
結果判定
陰性對照和空白對照均未出現條帶,陽性對照出現預期大小的擴增條帶,待測樣品出現預期大小的擴增條帶則判定為PCR結果陽性,科標生物檢測中心報告“檢出某型(A,B,E,F)肉毒梭菌”。待測樣品未出現預期大小的擴增條帶則判定為PCR結果為陰性,科標生物檢測中心報告“未檢出某型(A,B,E,F)肉毒梭菌”。
檢測咨詢熱線:0532-58979362 24小時應急熱線:18906422741 聯系人:李工
QQ:2482063104 企業郵箱:ssbta@sscta.cn 中心網站:http://www.ssbta.cn
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