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一、概況

Ames試驗又稱鼠傷寒沙門氏菌/哺乳動物微粒體試驗。本方法是利用鼠傷寒沙門菌的組氨酸營養(yǎng)缺陷型菌株發(fā)生回復突變的性能來檢測被檢物質是否具有致突變性。

二、試驗原理

AMES試驗是一種利用微生物進行突變的體外致突變實驗法，利用一種利用突變型微生物菌株與被檢化學物質接觸，如果該化學物質具有致突變性，則可使突變性微生物發(fā)生回復突變，重新成為野生型微生物。

具有組氨酸缺陷型的沙門氏菌株，均含有控制His合成的基因，而培養(yǎng)基中不含組氨酸時，它們便不能生長。然而，當某些被檢物質具有致突變性時，因這類物質作用于細菌的DNA，使其特定部位發(fā)生基因突變而回復為有合成His能力的野生型菌株時，就又能在無組氨酸的培養(yǎng)基中生長。常用的沙門氏菌株有TA98、TAl535、TA100和TA1588。每種菌株所檢測的誘變物的種類不同，每次試驗可同時使用幾種菌株，只要其中有任何一株發(fā)生回變即屬陽性反應結果。

考慮到許多物質是在體內經(jīng)代謝活化后才顯示出致突變性，艾姆斯等人采用了在體外加人哺乳動物肝微粒體酶系統(tǒng)(簡稱S-9混合液)使被檢物活化的方法，保證了試驗結果更近似于哺乳動物的代謝情況，同時可提高陽性檢出率。S-9混合液是在低溫無菌的條件下制備的，它是經(jīng)多氯聯(lián)苯或苯**誘導的雄性大白鼠**制成勻漿離心后的上清液。每次試驗之前從液氮罐中取出上清液后，再加入輔酶和6-磷酸-葡萄糖，即為配制成的肝微粒體酶系統(tǒng)。但是，在檢測飲用水樣時，加入S-9混合液并不能提高其陽性檢出率，而要發(fā)致突變陰性報告時，則必須要做加入S-9混合液檢驗各個項目均為陰性，并有重現(xiàn)性才能發(fā)陰性報告

三、步驟和方法

Ames試驗的常規(guī)方法有斑點試驗和平板摻入試驗。菌株鑒定用于測試的菌株，需經(jīng)基因型和生物學性狀鑒定，符合要求才能投入使用。鑒定前先進行增菌培養(yǎng)。為鑒定結果可靠，需同時培養(yǎng)野生型TV菌株，作為測試菌基因型之對照。