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篤瑪驢血清說明書

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品　　牌：
DM

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出廠價(jià)：
1 元/瓶

主要規(guī)格：
100ml/500ml

用　　途：
科研

驢血清操作步驟試管法（改良 Mayer 法） 1、致敏羊紅細(xì)胞： 2%綿羊紅細(xì)胞加等量稀釋后的溶血素（ 1:2000），混勻，置 37℃水浴 30min。 2、稀釋血清：待測(cè)血清 0.2ml，加應(yīng)用液 3.8ml，稀釋度為 1:20。 3、配制溶血標(biāo)準(zhǔn)管：全溶血管:2%綿羊紅細(xì)胞 2ml 加 8ml 蒸餾水，混勻。 50%溶血管:取全溶血管液 2ml 加緩沖液 2ml。 4、按表所示，依次加各成分于試管中，混勻，置 37℃水浴 30min，第 10 管為非溶血對(duì)照：補(bǔ)體 CH50 測(cè)定試管法 5、結(jié)果測(cè)定：取出試管， 2000r/min 離心 10min，對(duì)照管應(yīng)不溶血。肉眼比色，選與 50%溶血標(biāo)準(zhǔn)管相近二管，再用分光光度計(jì)測(cè)（波長(zhǎng) 542nm、 0.5cm 比色杯） OD 值，確定與標(biāo)準(zhǔn)管最接近者為終點(diǎn)管，然后按下公式計(jì)算 CH50 值：血清補(bǔ)體 CH50（ U/ml） =（ 1/血清用量）×稀釋度。如第 5 管為終點(diǎn)管，測(cè)待測(cè)血清中CH50為66.7U/ml。血清補(bǔ)體CH50正常值為50-100U/ml。驢血清常用標(biāo)簽包括有Flag、myc、HA、His、GST、GFP、MBP等。 Flag標(biāo)簽系統(tǒng)利用一個(gè)短的親水性八氨基酸肽（DYKDDDDK）融合到目標(biāo)蛋白；其純化條件是非變性的，因此可以純化所有有活性的融合蛋白。 His標(biāo)簽是由6個(gè)組氨酸（His-His-His-His-His-His）組成的短肽，專門設(shè)計(jì)用于重組蛋白的吸附純化。由于分子量小，且較容易分離和純化，是目前使用最廣泛的一種。 GST標(biāo)簽體系具有蛋白表達(dá)率高，表達(dá)產(chǎn)物純化方便，利于GST抗體制備的特點(diǎn)。GST融合蛋白在水溶液中可溶，可從細(xì)菌裂解液中提取，在不變性的條件下通過親和層析得到。 GFP或其突變體EGFP等廣泛用于基因表達(dá)效率的檢測(cè)，以及和目的蛋白融合表達(dá)用于檢測(cè)目的蛋白的表達(dá)和分別。GFP抗體不經(jīng)可以檢測(cè)GFP或其適當(dāng)?shù)耐蛔凅w，也可以檢測(cè)和GFP或其適當(dāng)?shù)耐蛔凅w融合表達(dá)蛋白的表達(dá)、細(xì)胞內(nèi)定位，以及純化、定性或定量檢測(cè)GFP融合表達(dá)蛋白等。 Myc標(biāo)簽（序列為：EQKLISEEDL）已成功應(yīng)用于WB雜交技術(shù)、免疫沉淀IP和流式細(xì)胞術(shù)中。因此可用于檢測(cè)重組蛋白在細(xì)菌、酵母、昆蟲細(xì)胞和哺乳細(xì)胞中的表達(dá)情況。Myc重組蛋白質(zhì)可通過偶聯(lián)Myc標(biāo)簽抗體活化的瓊脂糖上而進(jìn)行親和純化。但Myc重組蛋白的低pH洗脫條件往往會(huì)降低蛋白質(zhì)的活力，因此Myc標(biāo)簽系統(tǒng)廣泛應(yīng)用于檢測(cè)但很少用于純化。 HA標(biāo)簽系統(tǒng)利用一個(gè)HA（influenza hemagglutintin epitope:YPYDVPDYA）短肽融合到目標(biāo)蛋白。HA標(biāo)簽可位于蛋白質(zhì)的C端或N端，該系統(tǒng)已廣泛應(yīng)用于多種細(xì)胞類型，相應(yīng)的HA標(biāo)簽抗體也被廣泛運(yùn)用。 MBP標(biāo)簽蛋白大小為40kDa，由大腸桿菌K12的malE基因編碼。MBP可增加在細(xì)菌中過量表達(dá)的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。如果蛋白在細(xì)菌中表達(dá)，MBP可以融合在蛋白的N端或C端。可用MBP抗體或表達(dá)的目的蛋白特異性抗體檢測(cè)MBP標(biāo)簽標(biāo)記的重組蛋白。其余標(biāo)簽抗體還有V5、GFP、RFP、β-Actin、β-Tubulin、GAPDH、ERK1、AU1、Avi、B、CBP、DDDDK、E、E2、Glu-Glu、HAT、HPC4、HSV、KT3、KLH、MAT、Protein A、S、S1、SNAP、SRT、NWSHPQFEK、SUMO、T7、Tag-100、TAP、Trx、Ty1、TF、Universal、VSV-G等，但應(yīng)用相對(duì)較少。驢血清性能: 1．準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。 2．靈敏度：最低檢測(cè)濃度小于10 pg/ml。 3．特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。 4．重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。上海篤瑪生物科技有限公司包被抗體均使用進(jìn)口抗體，質(zhì)量穩(wěn)定，性價(jià)比高優(yōu)勢(shì)： 1.高效，靈敏，特異的抗體 2.穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性 3.吸附性能好，空白值低，孔底透明度高和固相載體 4.適用血清，血漿，組織勻漿液，細(xì)胞培養(yǎng)上清液，尿液等多種標(biāo)本類型上海篤瑪生物科技有限公司供應(yīng)的經(jīng)國家認(rèn)證，以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，在同等質(zhì)量條件下通過大規(guī)模生產(chǎn)或技術(shù)進(jìn)步降低成本，并得到權(quán)威的確證方法和確證的樣品進(jìn)行檢測(cè)。公司專業(yè)提供各種種屬，供應(yīng)的ELISA試劑盒統(tǒng)一價(jià)銷售。

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楊燕燕

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