檢測認證人脈交流通訊錄
篤瑪 雞神經絲蛋白3(NEF3) ELISA 試劑盒 說明
- 雞神經絲蛋白3(NEF3) ELISA 試劑盒
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
雞神經絲蛋白3(NEF3) ELISA 試劑盒
免責聲明
1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所產生的一切后果,由實驗者承擔,本公司概不負責。
2. 嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔。
雞神經絲蛋白3(NEF3) ELISA 試劑盒
Elisa試驗操作中可能影響結果的原因及其相應的解決辦法
1 選擇試劑 選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡至少30分鐘。
2 加樣 可能原因: 1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣; 2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。解決辦法: 1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。 2) 加樣后及時放入孵箱。 3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。 4) 如果采用AT或其他全自動加樣,最好選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育 可能原因: 1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗徹底; 2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗徹底。解決辦法: 1) 貼封片或加蓋; 2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板 可能原因: 1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不徹底;洗板針堵塞,抽吸不完全;洗板不暢,導致洗板效果差。 3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法: 1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后最好在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干; 2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5 顯色 可能原因: 1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑; 2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法: 1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流; 3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止 可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板 如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸;盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時做好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。
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