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代做實驗――細胞轉(zhuǎn)染服務(wù)

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主要規(guī)格：
無

用　　途：
代做實驗

上海卓康以質(zhì)量為本，樹立“卓康質(zhì)量”是公司的發(fā)展目標。我們一直加倍努力，竭盡全力做到不辜負您的支持與信賴。同時公司也離不開廣大客戶的幫助支持，真誠邀請國內(nèi)外有實力的實驗室、生物技術(shù)公司合作，共同發(fā)展。目前卓康提供的服務(wù)范圍包括：生物合成siRNA、shRNA的制備；轉(zhuǎn)錄編碼shRNA的DNAs、轉(zhuǎn)錄編碼shRNA的質(zhì)粒載體訂購；siRNA靶位的設(shè)計和實驗選擇分析；siRNA相關(guān)試劑和RNA技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品的代理銷售；重組病毒構(gòu)建包裝；基因蛋白表達、載體構(gòu)建、多克隆抗體和單克隆抗體制備；多種細胞學(xué)服務(wù)；常用的分子生物學(xué)試劑、實驗儀器、實驗耗材銷售等。卓康在分子生物學(xué)和免疫學(xué)實驗技術(shù)，特別抗體制備技術(shù)方面同樣具有豐富經(jīng)驗，提供快速、優(yōu)質(zhì)、性價比高的實驗服務(wù)。代做實驗――細胞轉(zhuǎn)染服務(wù) 技術(shù)簡介: 質(zhì)脂體轉(zhuǎn)染質(zhì)脂體為人工膜泡，可作為體內(nèi)，體外物質(zhì)轉(zhuǎn)送載體。將需轉(zhuǎn)移的DNA或RNA包裹于質(zhì)脂體，由于質(zhì)脂體具有磷脂雙層與胞膜相似，因此，可與細胞膜融合，將DNA轉(zhuǎn)入宿主細胞。影響轉(zhuǎn)染效率差異的主要原因是細胞系間個體的差異，有的細胞系細胞膜通透性較好，質(zhì)脂體復(fù)合物較容易進入細胞，轉(zhuǎn)染效率就高。又有的細胞系本生就不容易被轉(zhuǎn)染。其次脂類與DNA形成易于轉(zhuǎn)染結(jié)構(gòu)的特性存在負面效應(yīng)。其中主要的問題是毒性，表現(xiàn)為細胞聚集在一起，從壁上脫落。另為脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染易于受到血清中的脂肪與脂蛋白以及細胞外基質(zhì)中帶店成分，如硫酸軟骨素等干擾引起細胞死亡從而影響轉(zhuǎn)染效率。電穿孔轉(zhuǎn)染核酸不能自動進入細胞，需要協(xié)助才能穿過細胞壁的物理屏障進入能夠進行表達和/或復(fù)制的胞內(nèi)位點。電流能夠可逆地擊穿細胞膜形成瞬時的水通路或膜上小孔促使DNA分子進入胞內(nèi)，這種方法就是電穿孔。電穿孔的主要應(yīng)用優(yōu)勢是適用的細胞范圍廣，不論真核細胞還是原核細胞都能被有效轉(zhuǎn)染。當(dāng)遇到某些脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染效率很低和幾乎無法轉(zhuǎn)入時建議用電穿孔法轉(zhuǎn)染。一般情況下，高電場強度會殺死50%-70%的細胞。這種致命的后果根據(jù)細胞系的不同而異，與加熱或電解無關(guān)，也與當(dāng)時施加的能量與密度無關(guān)。相反，細胞死亡與電場強度與整體作用時間相關(guān)。我們公司針對細胞死亡開發(fā)出了一種電轉(zhuǎn)保護劑，大大的降低了細胞的死亡率，同時也提高了電穿孔轉(zhuǎn)染效率。腺病毒感染對于質(zhì)脂體轉(zhuǎn)染與電穿孔轉(zhuǎn)染都無法成功轉(zhuǎn)染的細胞系建議用腺病毒感染此法可以快速100％感染率，檢測成功率高。服務(wù)內(nèi)容： 1．轉(zhuǎn)染目的載體確認細胞轉(zhuǎn)染效率 2．轉(zhuǎn)染目的載體后進行相關(guān)檢測實驗客戶須知： 1．一般情況下細胞的轉(zhuǎn)染效率達到50%，我們才可以成功進行后續(xù)檢測實驗。如果在25%-40%，可以進行G418瞬時篩選，低于25%也可以做G418的穩(wěn)定篩選，大部分情況下我們都會建議用大流式細胞儀進行篩選，此方法既快速又方便，而且可以得到100%的陽性細胞，一般經(jīng)過大流式篩選的細胞做后續(xù)基因水平或蛋白水平檢測都可以得到理想的結(jié)果。 2．客戶需提供高效率毒性低的轉(zhuǎn)染試劑（質(zhì)脂體）或購買我們公司代理的德國Biontex公司脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑（此試劑轉(zhuǎn)染效率中上等優(yōu)點是毒性低） 3．如客戶提供細胞系轉(zhuǎn)染效率達到50%，我們可以順利快速進行實驗，約1－2個工作日就可完成此實驗。如客戶提供細胞系轉(zhuǎn)染效率低于50％，我們就要進行1－2個工作日的 G418的篩選實驗，轉(zhuǎn)染效率低于25％，無論做G418的穩(wěn)定篩選還是大流式篩選實驗時間都將推后2－3個工作日。服務(wù)價格：具體價格根據(jù)客戶實驗而定聯(lián)系電話：021－55660344，021－55063976 傳真：021－55063976 網(wǎng)址：www.elisabio.com 網(wǎng)址：www.antibodybio.com 聯(lián)系人：黃力，業(yè)務(wù)qq: 909447355 公司對外郵箱：sales@elisabio.com

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