大連液相色譜儀｜色譜柱｜色譜保修｜南京科捷

　　大連液相色譜儀簡介：

　　利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異，對混合物進行先分離，而后分析鑒定的儀器。液相色譜儀根據固定相是液體或是固體，又分為液-液色譜(LLC)及液-固色譜(LSC)。

　　大連液相色譜儀的組成：P600寶石恒流泵、UV600紫外檢測器、7725i六通進樣閥、進口C18柱(150x4.6 5u)、WS600色譜工作站。

　　大連液相色譜儀的特點：分離效能高、靈敏度高、分析速度快、應用范圍廣

　　大連液相色譜儀應用領域：制藥、生命科學、臨床醫學、食品安全、環境監測

　　液相色譜流動相的性質要求

　　一個理想的液相色譜流動相溶劑應具有低粘度、與檢測器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。

　　選好填料(固定相)后，強溶劑使溶質在填料表面的吸附減少，相應的容量因子k降低；而較弱的溶劑使溶質在填料表面吸附增加，相應的容量因子k升高。因此，k值是流動相組成的函數。塔板數N一般與流動相的粘度成反比。所以選擇流動相時應考慮以下幾個方面：

　　①流動相應不改變填料的任何性質。低交聯度的離子交換樹脂和排阻色譜填料有時遇到某些有機相會溶脹或收縮，從而改變色譜柱填床的性質。堿性流動相不能用于硅膠柱系統。酸性流動相不能用于氧化鋁、氧化鎂等吸附劑的柱系統。

　　②純度。色譜柱的壽命與大量流動相通過有關，特別是當溶劑所含雜質在柱上積累時。

　　③必須與檢測器匹配。使用UV檢測器時，所用流動相在檢測波長下應沒有吸收，或吸收很小。當使用示差折光檢測器時，應選擇折光系數與樣品差別較大的溶劑作流動相，以提高靈敏度。

　　④粘度要低(應<2cp)。高粘度溶劑會影響溶質的擴散、傳質，降低柱效，還會使柱壓降增加，使分離時間延長。最好選擇沸點在100℃以下的流動相。

　　⑤對樣品的溶解度要適宜。如果溶解度欠佳，樣品會在柱頭沉淀，不但影響了純化分離，且會使柱子惡化。

　　⑥樣品易于回收。應選用揮發性溶劑。

　　怎樣選擇液相色譜柱

　　現代高效液相色譜中，分離效果好壞很大程度上取決于色譜填料的選擇。

　　正相色譜：(液相色譜柱)

　　正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica)，以及其他具有極性官能團，如胺基團(NH2,APS)和氰基團(CN，CPS)的鍵合相填料。由于硅膠表面的硅羥基(SiOH)或其他團的極性較強，因此，分離的次序是依據樣品中的各組份的極性大小，即極性強弱的組份最先被沖洗出色譜柱。正相色譜使用的流動相極性相對比固定相低，如：正乙烷(Hexane),氯仿(Chloroform),二氯甲烷(Methylene Chloride)等。

　　反相色譜：(液相色譜柱)

　　反相色譜填料常是以硅膠為基礎，表面鍵合有極性相對較弱的官能團的鍵合相。反相色譜所使用的流動相極性較強，通常為水，緩沖液與甲醇，已腈等混合物。樣品流出色譜柱的順序是極性較強組合最先被沖出，而極性弱的組份會在色譜柱上有更強的保留。常用的反相填料有C18(ODS)、C8(MOS)、C4(B)、C6H5(Phenyl)等。

　　聚合物填料：(液相色譜柱)

　　聚合物調料多為聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等，其主要優點是在PH值為1～14均可使用。相對與硅膠基質的C18填料，這類填料具有更強的疏水性；大孔的聚合物填料對蛋白質等樣品的分離非常有效。現在的聚合物填料的缺點是相對硅膠基質填料，色譜柱柱效較低。

色譜保修：

　　如何預防液相泵的故障:

　　要保持泵的良好操作性能,必須維護系統的清潔,保證溶劑和試劑的質量,對流動相進行過濾和脫氣.下面列出預防泵故障的幾項措施:

　　1).用高質量試劑和HPLC級溶劑；

　　2)、過濾流動相和溶劑；

　　3)、脫氣；

　　4)、每天開始使用時放空排氣，工作結束后從泵中洗去緩沖液；

　　5)、不讓水或腐蝕性溶劑滯留泵中；

　　6)、定期更換墊圈；

　　7)、需要時加潤滑油；

　　8)、查閱有關泵操作手冊中的其它建議。

　　處于良好操作狀態的泵，應該能使色譜圖上的基線平穩；保留時間的重復性好。在等度洗脫時壓力波動小于2%。梯度洗脫時壓力變化應是緩慢和平穩的。

　　為了使故障發生后盡快排除，平時應常備密封、單向閥(入口與出口)、泵頭裝置、各式接頭、保險絲等部件，以及更換工具。

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