檢測認證人脈交流通訊錄
10個高效液相色譜應用實例—南京科捷分析儀器有限公司
例1．稠環芳烴分析(環境氣體分析)
樣 品：含六苯并苯等8種稠環芳烴的混合物
色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀，配有色譜工作站
檢測器：UV紫外檢測器，340nm
色譜柱：C18鍵合相（ODS-224）,5μm，柱長25cm，柱徑4.6mm
流動相：甲醇-二氯甲烷（8:2）混合溶劑
流 速：1mL/min
進 樣：20μL
結 果：所有組分在25min之內全部流出，各組分完全分離，組分出峰順序為：六苯并苯，二苯二萘嵌苯，三苯二萘嵌苯，苯萘并二萘嵌苯，四苯二萘嵌苯，萘六苯并苯，二苯萘并二萘嵌苯，苯菲并五苯。
例2．磺胺分析（藥物）
樣 品：磺胺、磺胺嘧啶、磺胺甲基異噁唑和甲氧芐氨嘧啶的混合物
色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀，740色譜數據處理機
檢測器：UV 481型紫外檢測器，波長240nm
色譜柱：μ-Bondapak C18 , 5μm，柱長25 cm，柱徑4.6 mm
流動相：由KH2PO4（0.05mol/L）和Na2HPO4(0.05 mol/L)以及MeOH所組成，其用量比例為200:10:165，
流 速：1mL/min
進 樣：10μL
結 果：所有組分在6min之內全部流出，各組分完全分離，組分出峰順序為：磺胺保留時間為2.60 min, 磺胺嘧啶保留時間為3.18 min、磺胺甲基異噁唑保留時間為4.33 min,甲氧芐氨嘧啶保留時間為5.19min。
例3．茶堿分析（茶葉）
樣 品：含茶堿等三種物質的混合物
色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀，配有色譜工作站
檢測器：UV紫外檢測器，280nm
色譜柱：Micro μBondapak C18 ，8μm，柱長25 cm，柱徑4.6 mm
流動相：二甲基二酰胺:甲醇:醋酸:水 = 23.5:1:0.5:75(v/v)
流 速：1mL/min
進 樣：10μL
結 果：所有組分8min之內全部流出，各組分完全分離，組分流出順序為：峰1為可可堿，峰2為茶堿，峰3為咖啡堿。
例4．銀杏內酯分析（藥物分析）
樣 品：含銀杏苦內酯等4種物質的混合物
色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀
配有570自動進樣器，Rheadyane 77251進樣閥，HP化學工作站
檢測器：500型ELSD Alltech 蒸發光散射檢測器
漂移管溫度為91℃，氮氣流速為2.75L/min
色譜柱：Platinum OPS，5μm，柱長25cm，柱徑4.6mm
流動相：水:甲醇:四氫呋喃 = 75:20:10
流 速：1mL/min
進 樣：10μL
結 果：所有組分在15min之內全部流出，各組分完全分離，組分流出順序為：峰1為銀杏苦內酯C, 峰2為白果內酯, 峰3銀杏苦內酯A, 峰4為銀杏苦內酯B。
例5．脂肪酸甲酯分析（藥物分析）
樣 品：含5種脂肪酸甲酯的混合物
色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀，配有色譜工作站
檢測器：500型ELSD Alltech 蒸發光散射檢測器
漂移管溫度為45℃，氮氣流速為1.5L/min
色譜柱：Silver Impregnated Ion-Exchange ,柱長25cm，柱徑4.6mm
流動相：乙腈:甲醇 = 2:98
流 速：0.75mL/min
進 樣：10μL
結 果：所有組分在10min之內全部流出，各組分完全分離，組分流出順序為：峰1為C18：0脂肪酸甲酯，峰為C18：1脂肪酸甲酯，峰3為C18：2脂肪酸甲酯，峰4為C18：3脂肪酸甲酯，峰1為C20：4脂肪酸甲酯。
例6．脂肪酸直接分析
樣 品：未經衍生處理的亞麻酸等6組分的混合物
色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀，四元梯度泵，色譜工作站
檢測器：500型ELSD Alltech 蒸發光散射檢測器
漂移管溫度為65℃，氮氣流速為2.0L/min
色譜柱：AlltimaTM C18 ，5μm，柱長25cm，柱徑2.1mm
流動相：A為水，B為乙腈
梯 度 時間 0min 10min 15min 20min
A 13% 20% 20% 5%
B 77% 80% 80% 95%
流 速：0.4mL/min
進 樣：20μL
結 果：所有組分20min之內全部流出，各組分完全分離，組分流出順序為：峰1為亞麻酸，峰2為肉豆蔻酸，峰3為亞油酸，峰4為棕櫚酸，峰5為油酸，峰6為硬脂酸。
例7：氨基酸衍生物分析（食品分析）
樣 品：22種氨基酸的苯基乙酰硫脲混合物
色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀，梯度洗脫裝置，色譜工作站
檢測器：UV紫外檢測器，波長254nm
色譜柱：柱長25cm，柱徑0.46cm Zorbax ODS柱（Dupont）
流動相：A液為0.01mol/L的NaAc, pH =4.5
B液為CH3CN
梯 度：0min～6min B/A = 24/76～42/58（v/v）
6min～14min B/A = 42/58（v/v）
14min～20min B/A = 24/76（v/v）
流 速：1mL/min
進 樣：自動進樣器進樣10μL
結 果：所有組分在20min之內全部流出，各組分完全分離，組分出峰順序為：峰1為ASP，峰2為GLU，峰3為ASN，峰4為SER，峰5為GLN，峰6為THR，峰7為GLY，峰8為MET·SO2 ,峰9為HYP, 峰10為ALA，峰11為TYR，峰12為HIS，峰13為CYS（CH2），峰14為VAL，峰15為MET，峰16為PRO，峰17為TRP，峰18為LYS，峰19為PHE，峰20為ILE，峰21為LEU，峰22為ARG。
例8．氨基酸直接分析
樣 品：12種未衍生氨基酸混合物溶液（1mMol/L）
色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀，四元梯度泵
配有二極管陣列檢測器、蒸發光散射檢測器和化學工作站
檢測器：500型ELSD蒸發光散射檢測器
漂移管溫度為95℃，氮氣流速2.5L/min
色譜柱：Alltima C18 , 5μm，柱長25cm，柱徑4.6mm
流動相：A為含0.1% TFA的水
B為含0.1% TFA的乙腈
梯 度: 時間 0min 5min 20min
A液 100% 100% 60%
B液 0% 0% 40%
流 速：0.6mL/min
進 樣：20μL
結 果：所有組分在25min之內全部流出，各組分完全分離，組分流出順序為：峰1為絲氨酸，峰2為賴氨酸，峰3為谷氨酸，峰4為精氨酸，峰5為脯氨酸，峰6為纈氨酸，峰7為甲硫氨酸，峰8為酪氨酸，峰9為異亮氨酸，峰10為亮氨酸，峰11為苯丙氨酸，峰12為組氨酸。
例9．糖類分析（食品分析）
樣 品：含果糖等6種糖類物質的混合物
色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀，四元梯度泵，色譜工作站
檢測器：Mark ⅡA型ELSD Alltech 蒸發光散射檢測器
漂移管溫度為100℃，氮氣流速為2.2L/min。
色譜柱：Absorbosphere, NH2 ，柱長25cm，柱徑4.6mm
流動相：A為乙腈，B為水
梯 度：時間 0min 20min
A 85% 75%
B 15% 25%
流 速：1.5mL/min
進 樣：20μL
結 果：所有組分在24min之內全部流出，各組分完全分離，組分流出順序依次為：峰1為果糖，峰2為葡萄糖，峰3為蔗糖，峰4為麥芽糖，峰5為乳糖，峰6為棉籽糖。
例10．嘌呤分析（藥物）
樣 品：取1mL血漿加入200μL的1.98mol/L的高氯酸（GR），再加入600μL蒸餾水和200μL的1.47mol/L的別嘌呤醇（內標），用旋轉混合器振搖10s于1200g離心10min，取上層清液備分析用。
色譜儀：“南京科捷LC600”液相色譜儀，配有色譜工作站
檢測器：UV紫外檢測器，254nm
色譜柱：μBondapsk C18 ，10μm，柱長30cm，柱徑3.9mm
流動相：0.02mol/L的磷酸二氫鉀，pH = 2.2
流 速：2.0mL/min
進 樣：10μL
結 果：所有組分在12min之內全部流出，各組分分離完全，保留時間依次為：尿嘌呤為3.18min（峰1），腺嘌呤為3.21 min（峰2），次黃嘌呤為3.90 min（峰3），5-羥基吡嗪酸為4.75min（峰4），5-羥基吡嗪胺為5.31 min（峰5），黃嘌呤為5.90 min（峰6），吡嗪酸為7.35min（峰7），內標別嘌呤醇為8.53min（峰8），吡嗪胺為9.57min（峰9）。
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10個高效液相色譜應用實例—南京科捷分析儀器有限公司
