檢測認證人脈交流通訊錄
- 無血清凍存液凍存步驟：
1. 常規方法收集對數期的貼壁細胞或懸浮細胞于試管中；
2. 確認所需凍存的細胞數量；
3. 將所需凍存細胞收集于離心管中，1000rpm，5min 離心，收集細胞沉淀，并棄掉上清液；
4. 加入適量的無血清細胞凍存液于離心管中，加入量按照細胞保存濃度為 5X105 至 1X107/ml 密度，輕柔的混勻細胞，獲取細胞混合液；
5. 將獲取的細胞混合液按照 1~1.5ml/管，分裝于凍存管中；
6. 將凍存管直接放入-80℃保存，可長期保存。
無血清凍存液細胞復蘇步驟：
1. 從-80℃取出凍存細胞，立即放入 37℃水浴鍋快速解凍；
2. 待細胞混合液徹底解凍融化后，立即加入 1ml 細胞培養基，混合；
3. 將混合液移至含有約5ml該細胞培養基的離心管中，1000rpm，5min離心，棄掉上清，獲取細胞沉淀；
4. 加入適量的新鮮細胞培養基，輕柔混勻，并將混合液轉移至培養容器，觀察細胞狀態正常后，進行后續細胞培養工作。
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