檢測認證人脈交流通訊錄
- 蛋白質相互作用在細胞內外的各種生物過程中起著至關重要的作用,如信號傳導、代謝調控和免疫反應等。研究這些相互作用對于理解生命科學的基本機制以及開發新藥具有重要意義。SPR分子互作儀由于其高靈敏度、無需標記和實時監測等優點,成為研究蛋白質相互作用的工具之一。
SPR技術基于光學原理,通過檢測金屬表面等離子體共振條件的變化來監測分子相互作用。當一束偏振光照射到薄金膜(通常是金或銀)上時,在特定角度會產生表面等離子共振,此時金膜表面的電子云與入射光發生共振,導致反射光強度急劇下降。
如果在金膜表面固定了某種分子,當另一種分子在流動相中通過并與其結合時,會引起局部折射率的變化,從而改變共振條件,通過檢測共振角的變化即可實時監測分子的相互作用過程。
實驗方法
SPR實驗一般包括以下幾個步驟:
1.表面準備:在金膜表面固定待研究的蛋白質(稱為配體),常用的固定方法包括共價結合、生物素-親和素結合和疏水吸附等。
2.樣品注入:將含有待測分子的溶液(稱為分析物)注入流動池,通過流體系統使其與固定在表面的配體接觸。
3.數據采集:實時記錄共振角的變化,生成代表分子相互作用的響應曲線(sensorgram)。
4.數據分析:通過分析響應曲線,計算出結合動力學參數(如結合速率常數k_on、解離速率常數k_off)和親和力常數(K_D)。
SPR分子互作如有需要歡迎訪問以下網址與我們取得聯系
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