檢測認證人脈交流通訊錄
- 綿羊骨保護素(OPG) ELISA 試劑盒 酶聯免疫試驗步驟 將所需試劑從4℃冷藏環境中取出，置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時可能會有結晶需恢復到室溫以充分溶解 ，每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數量的微孔板及框架，將不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。 編 號：將樣本和標準品對應微孔按序編號，每個樣本和標準品做2孔平行，并記錄標準孔和樣本孔所在的位置 。 加樣反應：加標準品或樣本50μl/孔到各自的微孔中，然后加酶標記物50μl/孔，再加入50μl/孔的抗體工作液，用 蓋板膜封板，輕輕振蕩5秒混勻，25℃反應30分鐘。 洗 滌：小心揭開蓋板膜，將孔內液體甩干，用工作洗滌液250μl/孔充分洗滌5次，每次間隔30秒，用吸水紙拍 干（拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破）。 顯 色：每孔加入底物液A 50μl，再加底物液B 50μl，輕輕振蕩5秒混勻，25℃避光顯色15分鐘（若藍色過淺， 可適當延長反應時間）。 終 止：每孔加入終止液50μl，輕輕振蕩混勻，終止反應。 測吸光值：用酶標儀于450nm處測定每孔吸光度值（建議用雙波長450/630nm）。測定應在終止反應后10分鐘內完 成。 綿羊骨保護素(OPG) ELISA 試劑盒 標本要求 1. 血清： 室溫血液自然凝固10-20 分鐘后，離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。保 存過程中如有沉淀形成，應再次離心。 2. 血漿： 應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20 分鐘后，離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成應再次離心。 3.尿液： 用無菌管收集。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀 形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。 4.細胞培養上清： 檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。 5.培養細胞: 檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100 萬/ml 左右。 通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20 分鐘左 右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。 6.組織標本: 切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化 后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻 漿器將標本勻漿化。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢 測，其余冷凍備用。 7.標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進 行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融 8.不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。 綿羊骨保護素(OPG) ELISA 試劑盒 免責聲明 1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所產生的一切后果，由實驗者承擔，本公司概不負責。 2. 嚴格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。
