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代做實(shí)驗(yàn)――MTT實(shí)驗(yàn)服務(wù)

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出廠價(jià)：
0

主要規(guī)格：
無

用　　途：
代做實(shí)驗(yàn)

上海卓康以質(zhì)量為本，樹立“卓康質(zhì)量”是公司的發(fā)展目標(biāo)。我們一直加倍努力，竭盡全力做到不辜負(fù)您的支持與信賴。同時(shí)公司也離不開廣大客戶的幫助支持，真誠(chéng)邀請(qǐng)國(guó)內(nèi)外有實(shí)力的實(shí)驗(yàn)室、生物技術(shù)公司合作，共同發(fā)展。目前卓康提供的服務(wù)范圍包括：生物合成siRNA、shRNA的制備；轉(zhuǎn)錄編碼shRNA的DNAs、轉(zhuǎn)錄編碼shRNA的質(zhì)粒載體訂購；siRNA靶位的設(shè)計(jì)和實(shí)驗(yàn)選擇分析；siRNA相關(guān)試劑和RNA技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品的代理銷售；重組病毒構(gòu)建包裝；基因蛋白表達(dá)、載體構(gòu)建、多克隆抗體和單克隆抗體制備；多種細(xì)胞學(xué)服務(wù)；常用的分子生物學(xué)試劑、實(shí)驗(yàn)儀器、實(shí)驗(yàn)耗材銷售等。卓康在分子生物學(xué)和免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)，特別抗體制備技術(shù)方面同樣具有豐富經(jīng)驗(yàn)，提供快速、優(yōu)質(zhì)、性價(jià)比高的實(shí)驗(yàn)服務(wù)。代做實(shí)驗(yàn)――MTT實(shí)驗(yàn)服務(wù) 技術(shù)原理： MTT比色法以活細(xì)胞代謝物還原劑3-(4,5-二甲基噻唑-2) –2，5-二苯基四氮唑嗅鹽，商品名為噻唑藍(lán)，簡(jiǎn)稱MTT 。檢測(cè)原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性的MTT還原成為難溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶物甲臢（formazan）并沉積在細(xì)胞中，而死去的細(xì)胞無此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細(xì)胞中的甲臢，利用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀測(cè)定490 nm波長(zhǎng)處的光密度OD值，可以間接反映出活細(xì)胞數(shù)量。在一定范圍內(nèi)，MTT結(jié)晶物形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比。該方法已經(jīng)廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測(cè)，大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選，細(xì)胞毒性試驗(yàn)以及腫瘤放射敏感性測(cè)定等。服務(wù)內(nèi)容: 我們多用與轉(zhuǎn)染目的載體后MTT檢測(cè)細(xì)胞增值：通用設(shè)置時(shí)間點(diǎn)12h，24h，36h，48h，72h（時(shí)間點(diǎn)也可由客戶定）組別設(shè)置：正常組，HK陰性對(duì)照組（主要是用來消除轉(zhuǎn)染試劑毒性的影響），目的載體組實(shí)驗(yàn)步驟： 1：接種細(xì)胞：接種細(xì)胞:用0.25%胰酶消化單層培養(yǎng)細(xì)胞,用完全培養(yǎng)液配成單層培養(yǎng)細(xì)胞懸液，以每孔103-104個(gè)細(xì)胞接種于96孔板中，每孔200vl；37度Co2箱陪養(yǎng)24h。 2:培養(yǎng)細(xì)胞：轉(zhuǎn)染目的載體后同一般培養(yǎng)條件，培養(yǎng)3－5天（可根據(jù)試驗(yàn)?zāi)康暮鸵鬀Q定培養(yǎng)時(shí)間）。 3：呈色：培養(yǎng)3－5天后，每孔加MTT溶液（5mg/ml用PBS <ph=7.4>配）20ul. 繼續(xù)孵育4小時(shí)，終止培養(yǎng)，小心吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)上清液，對(duì)于懸浮細(xì)胞需要離心后再吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)上清液。每孔加150ul DMSO，振蕩10分鐘，使結(jié)晶物充分融解。 4：比色：選擇490nm波長(zhǎng)，在酶聯(lián)免疫監(jiān)測(cè)儀上測(cè)定各孔光吸收值，記錄結(jié)果，以時(shí)間為橫坐標(biāo)，吸光值為縱坐標(biāo)繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線。注意事項(xiàng)：（1）選擇適當(dāng)?shù)募?xì)胞接種濃度。（2）避免血清干擾：一般選小于10％的胎牛血清的培養(yǎng)液進(jìn)行試驗(yàn)。在呈色后盡量吸盡孔內(nèi)殘余培養(yǎng)液。（3）設(shè)空白對(duì)照：與試驗(yàn)平行不加細(xì)胞只加培養(yǎng)液的空白對(duì)照。其他試驗(yàn)步驟保持一致，最后比色以空白調(diào)零。服務(wù)承諾: 1．提供每組平均OD值詳細(xì)記錄 2．由OD值繪制生長(zhǎng)曲線及結(jié)果分析服務(wù)價(jià)格：具體價(jià)格根據(jù)客戶實(shí)驗(yàn)而定聯(lián)系電話：021－55660344，021－55063976 傳真：021－55063976 網(wǎng)址：www.elisabio.com 網(wǎng)址：www.antibodybio.com 聯(lián)系人：黃力，業(yè)務(wù)qq: 909447355 公司對(duì)外郵箱：sales@elisabio.com

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