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檢測認(rèn)證人脈交流通訊錄
- 本試劑盒的原理為競爭ELISA。利用萃取液通過均質(zhì)及振蕩的方式提取樣品中的三聚氰胺進(jìn)行免疫測定。將三聚氰胺HRP標(biāo)記物、標(biāo)樣及樣品提取液加入包被三聚氰胺抗體的試驗(yàn)孔中孵育。在30分鐘的孵育過程中，樣品中的三聚氰胺與HRP標(biāo)記物競爭結(jié)合三聚氰胺抗體。孵育完后，傾去孔內(nèi)液體，洗滌除去未結(jié)合的三聚氰胺和HRP標(biāo)記物。每孔加入清澈的底物溶液，結(jié)合的酶標(biāo)記物將無色的底物轉(zhuǎn)化為藍(lán)色的物質(zhì)。孵育20分鐘后終止反應(yīng)，讀取各孔OD值。比較未知樣品的OD值與標(biāo)樣的OD值，就可計(jì)算出樣品中的三聚氰胺濃度。 檢測步驟 (注意: 標(biāo)準(zhǔn)及樣品最好做平行試驗(yàn)以增加準(zhǔn)確度.) 1. 將所有試劑及樣品置于室溫下，用實(shí)驗(yàn)室級的水充滿洗瓶。 2. 從鋁箔袋中取出相應(yīng)數(shù)量的微孔條，放入干燥劑并重新封好袋子以免微孔條受潮。 3. 吸取100ul標(biāo)樣或稀釋的樣品提取液到相應(yīng)的微孔。每個(gè)樣品使用一個(gè)新的吸頭。每孔加50ul三聚氰胺HRP酶標(biāo)記物。 4. 輕輕混合30秒，孵育30分鐘。 5. 孵育完后，將微孔中的溶液倒入水槽中，用洗液完全充滿微孔，震蕩后倒掉，重復(fù)三次，總共洗板四次。 6. 在吸水紙上拍打，盡可能將水拍干。 7. 每孔加入100ul底物溶液。 8. 孵育20分鐘。 9. 每孔加入100ul終止液。 10. 用酶標(biāo)儀讀取450nm下的吸光值。
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